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細胞培養(yǎng)

提供來源:上海百賀 日期:2023年01月03日

取您所需,利用徠卡顯微系統(tǒng)的細胞和組織培養(yǎng)倒置顯微鏡提高活細胞成像工作流程中的效率。

這些使用簡便的顯微鏡允許您根據(jù)自身需求配置相應(yīng)的成像解決方案,可搭載靈活多樣的聚光鏡選件和數(shù)字成像記錄功能,從未為您的實驗室打造恰到好處的解決方案。

徠卡細胞培養(yǎng)顯微鏡系統(tǒng)特性:

操作簡便,所需的培訓(xùn)和維護量很小,以便您將精力都集中在研究工作上

冷光源 LED 照明在所有光亮度級別下提供恒定的色溫

簡易熒光裝置 (選配) 可輕松呈現(xiàn)您的熒光標(biāo)記

高清成像 (選配) - 將高清攝像頭直接連接到顯示器或 PC;提供高質(zhì)量的可發(fā)表圖像        

靈活的工作距離,較高可達 80 mm,可容納載玻片、petri 培養(yǎng)皿、多孔板和較高的培養(yǎng)瓶

細胞工廠解決方案可容納較高 400 mm 的器皿

 

細胞分類

細胞外形

實驗室培育的動物細胞可根據(jù)多項標(biāo)準(zhǔn)進行區(qū)分:

顯微鏡下可以輕松地識別其形態(tài)。成纖維樣細胞為雙很或多很細長形狀,而上皮樣細胞呈多邊形。與上面兩種細胞不同的是,淋巴母細胞樣細胞并非貼壁生長,而是懸浮生長。

細胞的類型可細分為永生細胞、原代細胞和干細胞。

細胞組織形式可謂豐富多樣,從簡單的二維單層培養(yǎng)細胞到二維共培養(yǎng)細胞,再到三維球狀細胞團和類器官

Fibroblast-like cells, epithelial-like cells and lymphoblast-like cells (from left to right).

 

名稱

形態(tài)學(xué)

來源

COS

成纖維細胞樣

非洲綠猴

HEK 293

上皮樣

人類

CHO

上皮樣

倉鼠

MDCK

上皮樣

HeLa 細胞

成纖維細胞樣

人類

Jurkat

淋巴母細胞樣

人類

 

將細胞系用于細胞培養(yǎng)的一些實例。

細胞培養(yǎng)材料

如何培養(yǎng)細胞

動物細胞在各類不同的器皿中培養(yǎng),涵蓋用于基礎(chǔ)研究的小型微流體裝置、用于篩選目的的 96 孔板乃至用于大規(guī)模藥物生產(chǎn)的細胞培養(yǎng)瓶和細胞工廠。

鑒于其一次性使用特點,多數(shù)容器使用塑料制成。其它器皿則專為顯微鏡應(yīng)用優(yōu)化設(shè)計,因此具有玻璃底。

動物細胞培養(yǎng)基包含:

  • 能量來源
  • 氨基酸
  • 維生素
  • 以及鹽類

此外,它還包含緩沖系統(tǒng)和 pH 值指示劑,用于檢查 pH 值是否平衡。

細胞培養(yǎng)維護

您的日常工作內(nèi)容是什么?

由于細胞會消耗培養(yǎng)基中的成分,定期補充培養(yǎng)基。在這種情況下,細胞培養(yǎng)過程中應(yīng)進行目視檢查,以觀察匯合程度和健康度并檢測潛在的微生物污染。

永生細胞系的一個特征就是無限增殖。因此,它們時不時進行分裂 (傳代) 并轉(zhuǎn)移至單獨的培養(yǎng)器皿中。

通常,培養(yǎng)的細胞在用于實驗前就進行了基因改造。例如,借助 轉(zhuǎn)染操作,研究人員為所需要的蛋白質(zhì)添加 熒光標(biāo)記 ,以便通過顯微鏡將其可視化。

MDCK cells in different confluence stadiums.

顯微鏡 – 基本要求

我需要哪種工具?

為管理細胞培養(yǎng)實驗室的日常工作,顯微鏡是一件必需品。此類顯微鏡須具備倒置配置。倒置顯微鏡采用“物鏡位于樣品下方,聚光鏡位于樣品上方”的設(shè)計,這樣就能使物鏡盡量貼近細胞,并在上方保持較大的工作距離。

由于動物細胞的固有反差很低,細胞培養(yǎng)顯微鏡提供諸如相差等反差觀察法。DIC (微分干涉相差) 在這里無法發(fā)揮作用,因為該技術(shù)無法配合塑料器皿用于細胞培養(yǎng)。DIC 有一個很好的替代方案,那就是 IMC (整合調(diào)制相差),該技術(shù)不僅能搭配塑料容器使用,而且無需借助專用物鏡或棱鏡。此外,細胞培養(yǎng)顯微鏡應(yīng)易于操控,以避免浪費時間。 

徠卡細胞培養(yǎng)顯微鏡具備良好的易用性,并可針對個性化需求提供靈活多樣的反差觀察方法。

顯微鏡 – 高級要求

我需要哪種工具?

一種很常見的細胞生物學(xué)科研手段是使用熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)染細胞,以便使用研究型顯微鏡進行后續(xù)研究。如果您使用熒光蛋白,您的細胞培養(yǎng)顯微鏡還需要配備熒光選件,以用于控制轉(zhuǎn)染效率。

為實現(xiàn)重要的記錄和標(biāo)準(zhǔn)化目的,顯微鏡應(yīng)配備數(shù)字?jǐn)z像頭,至好能夠記錄和梳理拍攝的數(shù)據(jù)。

由于細胞培養(yǎng)實驗室都存在空間問題,細胞培養(yǎng)顯微鏡的尺寸不宜過大,例如,至好能安裝在超凈臺中。此外,至新趨勢都要求顯微鏡設(shè)計得足夠小巧和穩(wěn)固,以便在培養(yǎng)箱內(nèi)部使用。

Neuronal cells in brightfield, phase contrast and fluorescence microscopy (from left to right)

 

明場

相差

微分干涉相差 (DIC)

整合調(diào)制相差 (IMC)

熒光

放大倍率

工作距離

攝像頭

Leica DM IL LED

+

+

-

+

+

PH:5x 至 63x

IMC:10x、20x、32x、40x

40 mm、80 mm

+ (自由選擇)

Leica DMi1

+

+

-

-

-

10x、20x、40x

40 mm、50 mm、80 mm

+ (集成式)

 

用于大批量生產(chǎn)應(yīng)用的顯微鏡

生產(chǎn)生物材料 (例如蛋白質(zhì)、疫苗或抗體) 需要在大型器皿中培養(yǎng)細胞。

為應(yīng)對這一要求,相關(guān)的細胞培養(yǎng)顯微鏡須具備較大的工作距離和視場。此外,它需要具備很高的穩(wěn)定性,以便牢固地承載大型器皿乃至大量器皿。 

Leica DM IL LED 可使用超長透射光照明臂進行配置,以便您自由調(diào)節(jié)細胞培養(yǎng)器皿所需要的工作距離,高度至高可達 40 cm。

細胞檢測

活細胞應(yīng)用

細胞培養(yǎng)是一個動態(tài)過程。與其它任何生物系統(tǒng)一樣,細胞的生長和行為有時難以預(yù)測。因此,長期監(jiān)測比僅僅在單個時間點檢查細胞培養(yǎng)過程更具優(yōu)勢。

而這正是顯微鏡能夠一展所長的地方,您可將其放置在培養(yǎng)箱中,以便不間斷地監(jiān)測細胞。例如,借助這一特性,您可隨時隨地檢查細胞培養(yǎng)的匯合程度。 

           

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